一、能力驗(yàn)證
督察說明：同行教育記錄的抽查
同行教育計劃：針對僅對白血病和淋巴瘤的流式免疫表型數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和解釋的實(shí)驗(yàn)室，該實(shí)驗(yàn)室參與了血液淋巴腫瘤流式解讀的同行教育計劃。
注意：此清單項(xiàng)適用于不進(jìn)行樣本染色和流式數(shù)據(jù)獲取，但接收來自外部實(shí)驗(yàn)室的FCS文件和/或散點(diǎn)圖進(jìn)行解讀的實(shí)驗(yàn)室。參加同行教育計劃，對血液淋巴腫瘤和相關(guān)良性疾病進(jìn)行流式數(shù)據(jù)分析，為同行能力比較提供了寶貴的教育機(jī)會。雖然沒有完全模仿流式免疫表型分析中涉及的臨床環(huán)境，但此計劃中的同行數(shù)據(jù)可以提供一個有用的基準(zhǔn)，從而達(dá)到評估實(shí)驗(yàn)室性能的目的。
合規(guī)證據(jù)：有參加白血病/淋巴瘤流式解讀同行比較計劃的參與記錄，或有與其他實(shí)驗(yàn)室共同分析的病例記錄，或?qū)嶒?yàn)室自己分析并經(jīng)同行評審的記錄。
1、質(zhì)量管理和質(zhì)量控制
（1）試劑
督察說明：
新抗體驗(yàn)證記錄的抽查；新批次抗體和新檢測系統(tǒng)試劑確認(rèn)記錄的抽查 提問：您的實(shí)驗(yàn)室遵循哪些程序來確保遵循制造商關(guān)于試劑盒/對照試劑使用的建議？您如何確認(rèn)新試劑批次的可接受性？
試劑使用
遵循制造商關(guān)于在試劑盒程序中正確使用試劑和對照的建議。 合規(guī)證據(jù)：符合制造商說明的書面程序或使用替代程序的方法驗(yàn)證記錄
抗體滴定
在用于患者診斷之前，實(shí)驗(yàn)室已有新抗體的初始驗(yàn)證記錄。 注意：在測定中使用的抗體組合的背景下，使用的抗體在感興趣的細(xì)胞亞群上進(jìn)行驗(yàn)證。
新試劑批號確認(rèn)
將新批次的抗體和檢測系統(tǒng)試劑的性能與舊批次進(jìn)行比較，然后再投入使用并同時進(jìn)行維護(hù)。
注意：需要平行染色來對比試劑或儀器功能的差異。 建議在同一新鮮對照（患者或正常）上平行比較新試劑的結(jié)果，以確保新試劑批次與舊試劑批次具有臨床可比性。在具有確定驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)化控制下測試新試劑也是可接受的。 在使用新批次的抗體混合物之前，建議使用側(cè)向散射與熒光圖比較每個單獨(dú)的抗體，并定義從舊批次到新批次的驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。只有在新舊批次之間達(dá)成一致時，才能制作抗體混合物。
（2）記錄和報告
督察說明：患者報告的抽查（包括使用I類ASR時的免責(zé)聲明）；記錄保留策略（設(shè)門散點(diǎn)圖/直方圖）
ASR報告
如果使用從外部供應(yīng)商處獲得或購買的I類分析物特異性試劑（ASR）進(jìn)行患者檢測，則患者報告包括聯(lián)邦法規(guī)要求的免責(zé)聲明。
注意：ASR是抗體，包括多克隆和單克隆抗體、特異性受體蛋白、配體、核酸序列和類似試劑，通過與樣品中的物質(zhì)的特異性結(jié)合或化學(xué)反應(yīng)，用于診斷應(yīng)用以進(jìn)行鑒定和定量生物標(biāo)本中的單個化學(xué)物質(zhì)或配體。 ASR是實(shí)驗(yàn)室開發(fā)的測試系統(tǒng)的有效成分。 此清單涉及I類ASR。 I類ASR不受美國食品和藥物管理局（FDA）的預(yù)清除或FDA的特殊控制。大多數(shù)ASR是I類。此類試劑除外血庫用于篩查傳染病的那些（類別II或III），或用于診斷某些傳染病（例如HIV感染和肺結(jié)核）（III類）。 如果實(shí)驗(yàn)室使用I級ASR進(jìn)行患者檢測，聯(lián)邦法規(guī)要求以下免責(zé)聲明隨患者報告中的檢測結(jié)果一致："This test was developed and its performance characteristics determined by (laboratory name). It has not been cleared or approved by the US Food and Drug Administration." CAP建議加上其它說明，例如"FDA does not require this test to go through premarket FDA review. This test is used for clinical purposes. It should not be regarded as investigational or for research. This laboratory is certified under the Clinical Laboratory Improvement Amendments (CLIA) as qualified to perform high complexity clinical laboratory testing."。 使用以試劑盒形式與其他材料或儀器一起銷售的試劑的試驗(yàn)，以及與使用說明一起出售的試劑不需要免責(zé)聲明。 實(shí)驗(yàn)室必須出示使用I類ASR測試項(xiàng)目的性能指標(biāo)。
記錄保留
設(shè)門的散點(diǎn)圖和直方圖保留至少10年。需要FCS文件包含分析和門。 注意：該檢查列表要求的目的是保留血液淋巴腫瘤診斷的設(shè)門點(diǎn)圖和直方圖、CD34干細(xì)胞計數(shù)和先天性免疫缺陷評估等記錄至少10年。只要這部分信息能以電子方式獲得（例如.pdf、.tiff、.jpeg文件），就不需要設(shè)門散點(diǎn)圖和直方圖的紙質(zhì)副本。
（3）對照和標(biāo)準(zhǔn)品
督察說明：質(zhì)控策略和步驟的抽查；質(zhì)控記錄的抽查
提問：你如何確定質(zhì)控失控？什么時候需要采取措施？你的實(shí)驗(yàn)室如何建立或驗(yàn)證可接受的質(zhì)控范圍？
發(fā)現(xiàn)：選擇QC超出范圍的多次事件，并按照記錄確定所采取的步驟是否遵循實(shí)驗(yàn)室程序進(jìn)行糾正
質(zhì)控－試劑/染色
通過使用陽性對照驗(yàn)證試劑和染色程序的性能。
注意： 陽性對照的來源（類型）及其檢測頻率因特定的流式應(yīng)用而異。 頻率應(yīng)該是：1）每天做一次淋巴細(xì)胞亞群和CD34 +干細(xì)胞質(zhì)控，無論是使用單平臺還是雙平臺方法; 2）每月至少進(jìn)行一次白血病/淋巴瘤免疫分型的質(zhì)控。 單平臺檢測CD4 +淋巴細(xì)胞和CD34 +干細(xì)胞者，需要兩個水平的質(zhì)控品；對于雙平臺檢測淋巴亞群（CD4＋淋巴細(xì)胞），可以只用一個水平的陽性質(zhì)控品。 質(zhì)控品來源應(yīng)該是：1）外源的陽性質(zhì)控品，例如正常人淋巴細(xì)胞或商品化淋巴細(xì)胞、CD34＋干細(xì)胞定量、白血病/淋巴瘤免疫分型；2）內(nèi)部陽性質(zhì)控，即利用樣本中正常細(xì)胞做對照，僅適用于白血病/淋巴瘤免疫分型。 合規(guī)證據(jù)： 每項(xiàng)測試的質(zhì)量控制要求和性能的書面步驟 質(zhì)量控制結(jié)果的記錄
QC－單平臺/雙平臺檢測
對于單平臺定量測試（例如CD4+、CD34 +細(xì)胞濃度）和CD34+干細(xì)胞濃度的雙平臺定量，至少每天（或每次啟動流式細(xì)胞儀）分析至少兩個水平的陽性細(xì)胞對照以驗(yàn)證試劑的性能、制備方法、染色程序和儀器。 注意： 這些質(zhì)控品的其中一個水平應(yīng)該是（或接近）臨床決策水平，例如，HIV+個體中CD4+淋巴計數(shù)低至200個細(xì)胞/uL，或者準(zhǔn)備進(jìn)行外周干細(xì)胞采集的個體外周血中5-20個CD34 +干細(xì)胞/uL。當(dāng)沒有商品化質(zhì)控品時，實(shí)驗(yàn)室主任必須實(shí)施等效程序以滿足兩個水平的檢測要求。 在未進(jìn)行患者樣本檢測的日子不需要進(jìn)行質(zhì)控。 合規(guī)證據(jù)： 每項(xiàng)測試的質(zhì)量控制要求和性能的書面步驟 質(zhì)量控制結(jié)果的記錄
QC-參考范圍驗(yàn)證
為每批質(zhì)控原材料，均應(yīng)建立或驗(yàn)證統(tǒng)計學(xué)上有效的目標(biāo)平均值和范圍。 注意：對于未經(jīng)測試的質(zhì)控對照，實(shí)驗(yàn)室必須通過重復(fù)分析建立有效的可接受范圍，包括先前測試過的質(zhì)控原材料。 對于分析對照，實(shí)驗(yàn)室必須驗(yàn)證制造商提供的參考范圍。 合規(guī)證據(jù)： 建立和驗(yàn)證質(zhì)控范圍的書面步驟 每批質(zhì)控范圍驗(yàn)證的記錄
QC－糾正措施
當(dāng)控制結(jié)果超出規(guī)定的可接受限度時，會記錄糾正措施。
注意： 檢測時出現(xiàn)不可接受的結(jié)果，或者患者上次檢測結(jié)果與本次差異甚大時，需重新評估，以確定患者/客戶結(jié)果是否確實(shí)存在顯著臨床差異。 重新評估可以是重新測試患者樣本。 即使患者樣本不再可用，也可以重新評估測試結(jié)果，以尋找可能影響患者結(jié)果的失控狀況的證據(jù)。 例如，評估可以包括將本次患者檢測值與歷史患者平均值進(jìn)行比較，和/或根據(jù)先前結(jié)果檢查所選患者結(jié)果，以查看是否存在一致的偏差（所有結(jié)果當(dāng)前高于或低于先前的結(jié)果）。
QC-處理
質(zhì)控樣品與患者樣品一起，以相同的方式由相同的人員進(jìn)行測試。 注意：QC樣本必須由經(jīng)常進(jìn)行患者測試的人員進(jìn)行分析 - 這并不意味著每個操作員必須每天執(zhí)行QC，只要每個儀器和/或測試系統(tǒng)都按要求的頻率執(zhí)行QC，并且所有分析人員都能定期參與質(zhì)量控制即可。 在可能的范圍內(nèi)，必須控制測試程序的所有步驟，同時認(rèn)識到分析前和分析后的變量可能因患者不同而有所變化。 合規(guī)證據(jù)： 質(zhì)控樣品由處理患者樣品的人員處理，并有相關(guān)記錄
QC-確認(rèn)可接受性
在報告結(jié)果之前，對控制結(jié)果進(jìn)行審查以確定其可接受性。 注意：當(dāng)質(zhì)控品產(chǎn)生不可接受的結(jié)果時，不會報告患者檢測結(jié)果。
合規(guī)證據(jù)： 定義的QC范圍，并有確認(rèn)可接受的QC結(jié)果的記錄
每月QC審查
實(shí)驗(yàn)室主管對質(zhì)控數(shù)據(jù)進(jìn)行審查，至少每月一次。
注意：必須記錄質(zhì)量控制數(shù)據(jù)的審查，并包括以前未解決的異常值、趨勢或遺漏的后續(xù)行動。每月執(zhí)行次數(shù)少于一次的QC數(shù)據(jù)需要進(jìn)行審查。
合規(guī)證據(jù)： 質(zhì)量控制審查記錄，包括對異常值、趨勢或遺漏的后續(xù)行動
（4）流式細(xì)胞儀
督察說明： 光學(xué)校準(zhǔn)/激光輸出檢查的抽查 光學(xué)校準(zhǔn)、補(bǔ)償和激光檢查程序的抽查 用熒光染料標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)的記錄
提問： 您的實(shí)驗(yàn)室如何監(jiān)測儀器的重現(xiàn)性？ 您的實(shí)驗(yàn)室如何確保每種熒光染料都經(jīng)過適當(dāng)校準(zhǔn)？ 您的實(shí)驗(yàn)室如何確定適當(dāng)?shù)难a(bǔ)償設(shè)置？
光路校準(zhǔn)
有至少每天（或每次啟動流式細(xì)胞儀后）監(jiān)測光學(xué)校準(zhǔn)和儀器重現(xiàn)性的程序，并且有監(jiān)測記錄。
熒光素標(biāo)準(zhǔn)品
每天使用每種熒光染料標(biāo)準(zhǔn)品（例如熒光微球）進(jìn)行適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)化，并且記錄結(jié)果用于質(zhì)量控制。
補(bǔ)償設(shè)置
有設(shè)置正確熒光補(bǔ)償?shù)牟襟E。
激光電流
有書面步驟用于確定激光電流穩(wěn)定且可接受。
（5）移液裝置
督察說明： 移液校準(zhǔn)步驟 移液器檢查記錄抽查
移液準(zhǔn)確性
在投入使用之前，以規(guī)定的間隔（至少每年一次）檢查用于定量分配的移液器的準(zhǔn)確性和再現(xiàn)性，并記錄結(jié)果。
2、步驟和檢測體系
（1）免疫分型
督察說明： 選擇代表性檢測并遵循從標(biāo)本采集到最終結(jié)果報告的整個過程 如果在免疫表型分析程序?qū)彶檫^程中發(fā)現(xiàn)問題，請進(jìn)一步評估實(shí)驗(yàn)室的反應(yīng)、糾正措施和解決方案。
（2）全血淋巴亞群計數(shù)
淋巴細(xì)胞亞群分析策略和過程的抽查（包括設(shè)置標(biāo)記物以區(qū)分陰性和陽性細(xì)胞群的方法和程序） 提問： 您是如何建立或驗(yàn)證參考范圍的？ 您的實(shí)驗(yàn)室如何確保樣品完整性？ 處理樣本后如何儲存？ 您的實(shí)驗(yàn)室如何驗(yàn)證淋巴細(xì)胞門？ 如何設(shè)門保證淋巴細(xì)胞亞群的純度？
（3）CD34干細(xì)胞計數(shù)
CD34分析策略和步驟的抽查 CD34記錄的抽樣
提問： 您的實(shí)驗(yàn)室如何記錄CD34細(xì)胞活力？ 您的實(shí)驗(yàn)室如何定義CD34 +細(xì)胞群？ 您的實(shí)驗(yàn)室使用哪種抗CD34單克隆抗體，使用了什么熒光素？
（4）白血病和淋巴瘤
督察說明： 白血病/淋巴瘤免疫分型策略和步驟的抽查 患者報告和圖形的抽查
提問： 如果流式白血病/淋巴瘤免疫表型分析是在實(shí)驗(yàn)室之外做的，那么您的實(shí)驗(yàn)室如何確保信息足夠全面、設(shè)門正確以實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確診斷？（流式中文網(wǎng)注：我的理解可能是某些實(shí)驗(yàn)室只負(fù)責(zé)分析數(shù)據(jù)，而染色、上機(jī)等步驟在其它合作的實(shí)驗(yàn)室做的，例如第三方檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)，可以在各地設(shè)置流式檢測點(diǎn)，但分析和報告由總部統(tǒng)一執(zhí)行） 您的實(shí)驗(yàn)室在什么情況下檢測活細(xì)胞的百分比？ 您的實(shí)驗(yàn)室如何區(qū)分腫瘤細(xì)胞和非腫瘤細(xì)胞？ 您的實(shí)驗(yàn)室如何區(qū)分內(nèi)源性和外源性的免疫球蛋白染色？
（5）稀有細(xì)胞檢測
需要驗(yàn)證計數(shù)的低限。
（6）DNA檢測和細(xì)胞周期分析
督察說明： DNA分析策略和步驟的抽查 樣本評估記錄的抽查 DNA分析線性和QC記錄的抽查 次優(yōu)/樣本拒絕記錄/日志的抽查
提問： 當(dāng)收到不可接受或次優(yōu)的標(biāo)本時，您的實(shí)驗(yàn)室的解決方案是什么？ 您的實(shí)驗(yàn)室如何確保排除碎片和粘連體？ 您的實(shí)驗(yàn)室如何確保分析包含感興趣的腫瘤細(xì)胞？ 您的實(shí)驗(yàn)室如何確保檢測DNA非整倍性？
二、個人
教育和培訓(xùn)經(jīng)歷的記錄，至少有4年以上工作經(jīng)歷。
就這么多了，對于人這一部分，Checklist里面就這么幾句。
